Иммунохимические методы определения биомаркеров функционального состояния и нарушений различного генеза нашли широкое применение в ветеринарной лабораторной практике. Благодаря формированию комплекса «антиген – антитело» стало возможным обнаруживать и предотвращать развитие опасных заболеваний, существенно сокращать затраты на лечение животных, увеличивать продолжительность и повышать качество их жизни.
Разновидности иммунохимических методов, применимых в ветеринарии
В ветеринарной практике используется множество различных видов иммунного анализа, основанных на специфической реакции связывания антигена с антителом. К ним относятся гомогенные экспресс-тесты и гетерогенные высокочувствительные аналитические системы. Среди наиболее перспективных направлений следует выделить:
- ИФА типа ELISA (выявление бактериальных и вирусных антигенов);
- иммунохроматографию ИХА (скрининговую экспресс-диагностику инфекций, доступную к применению в полевых условиях);
- радиоиммуноанализ RIA (оценку гормонального профиля самок для управления репродуктивным циклом);
- поверхностный плазменный резонанс SRP и иммуноэнзимный анализ (для определения содержания токсинов, микотоксинов и остаточных веществ в кормах и непосредственно в организме животного).
Иммунодиагностические анализаторы и наборы активно применяются в ветеринарных лечебницах, специализированных лабораториях биотестирования и непосредственно на местах содержания животных.
Иммуноферментная диагностика формата ELISA
ИФА – это высокочувствительный и специфичный метод детекции антител, основанный на введении в один из этапов реакции специальной ферментативной метки с последующим образованием иммуноферментного конъюгата. По результатам специфических реакций обнаруживаются антитела к антигенам широкого ряда возбудителей:
- лептоспироз;
- вирусный гепатит;
- токсоплазмоз;
- микоплазмоз, хламидиоз;
- бешенство, псевдобешенство;
- инфекционная бурсальная птичья болезнь;
- чума плотоядных;
- парвовирус и пр.
Для иммуноферментной диагностики заболеваний птиц и животных применяются специальные наборы реагентов, определяющие IgG к антигенам конкретных возбудителей. Тестирование методом твердофазного ИФА с применением автоматизированного оборудования и реактивов позволяет получать качественные и количественные результаты, прогнозировать дальнейшее развитие болезни, оценивать эффективность вакцинации. При условии полного соблюдения правил подготовки и требований инструкции риск ошибки сводится к минимуму.
Возможности иммунохроматографии
Иммунохроматографические тесты, предназначенные для скрининговой и экспресс-диагностики вне лаборатории, – это прямые одношаговые исследования, длящиеся не более 5–10 минут. Новейшие технологии производства моноклональных антител и рекомбинантных антигенов обеспечивают высокую информативность исследования. В качестве биоматериала, приоритетного для того или иного теста, могут быть использованы сыворотка или плазма крови, слюна, слизь, экскременты и пр. Единственным неудобным моментом применения ИХА является необходимость подтверждения теста в условиях экспертной лаборатории.
Радиоиммуноанализ
Радиоиммунный анализ, основанный на конкурентном связывании меченых радионуклидом веществ со специфическими антителами, признан эталонным способом исследования гормонального профиля (ТТГ, ФСГ, ЛГ, ПРЛ, СТГ). Данная методика используется в ветеринарной медицине для получения информации о репродуктивной функции самок. Ее результаты учитываются при проведении селекционно-племенной работы: пересадке зародышей, искусственном осеменении, улучшении наследственных качеств и пр. В качестве аналита для проведения анализа применяются кровь (сыворотка, плазма), молоко или моча животного. Далее образец смешивается со специфическим антителом и помеченным гормоном (в качестве радиоактивной метки применяются йод-125 или тритий 3Н). Затем при помощи специальных счетчиков β- и γ-излучений осуществляется регистрация сигнала. В качестве альтернативного метода определения эндокринной функции может быть использован иммуноферментный анализ.
Технологии выявления токсинов
Для обеспечения безопасности кормов и обнаружения опасных токсинов или других чужеродных веществ непосредственно в организме животных применяются иммуноэнзимный анализ и экспресс-метод поверхностного плазменного резонанса. С их помощью определяются:
- анаболические гормоны;
- антибиотики;
- наркотические (допинговые) средства;
- опасные для здоровья грибковые токсины, поражающие печень животного, провоцирующие развитие иммунодефицита и злокачественных опухолей.
Применение эффективных тест-систем, совершенствование оригинальных методик и использование высокочувствительной аппаратуры позволяет ускорить и упростить иммунохимический процесс, быстрее принимать решения, повысить эффективность диагностики и уровень благополучия животных.